实验室常见的灭菌消毒方法
实验医学微生物学常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。
一、消毒和灭菌的区别
1、消毒(disinfection in hospital):杀灭或消除医院环境中媒介物上污染的病原微生物的过程.
2、灭菌(sterilization):杀灭或去除外环境中媒介物携带的一切微生物的过程.包括致病微生物和非致病微生物,也包括细菌芽胞和真菌孢子.灭菌是个绝对的概念,灭菌后物品必须是完全无菌的.即灭菌保证水平为10^6.
消毒灭菌方法
常用的消毒灭菌方法分为物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
高温灭菌法:
高温灭菌法是利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡,是应用最广泛且有效的灭菌方法。主要用于器械、容器、试剂等灭菌。
高压蒸气灭菌法:
用高温加高压灭菌,不仅可杀死一般的细菌,对细菌芽胞也有杀灭效果,是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。
主要用于能耐高温的物品,如金属器械、玻璃、橡胶、耐高温塑料制品及试剂的灭菌。
高压蒸气灭菌器的类型和样式较多,如:
①下排气式压力蒸气灭菌器是普遍应用的灭菌设备,压力升至102.9kPa,温度达121~126℃,维持20~30分钟,可达到灭菌目的。
②脉动真空压力蒸气灭菌器已成为目前最先进的灭菌设备。
灭菌条件要求:蒸气压力205.8kPa,温度达132℃以上并维持10分钟,即可杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切微生物。
湿热灭菌是目前实验室使用最为广泛,灭菌效果最佳的方法。目前湿热灭菌的仪器技术上也非常成熟,安全系数较高。
高压蒸气灭菌的注意事项:
包裹的物品不宜太大,一般应小于30cm×30cm×50cm,大于该尺寸需要酌情延长灭菌时间;
1.高压锅内的包裹不要排得太密,以免妨碍蒸气透入,影响灭菌效果;
2.对塑料制品不宜放置过于拥挤,以免发生形变;
3.压力、温度和时间达到要求时,指示带上和化学指示剂即应出现已灭菌的色泽或状态;
4.锐性器械,如刀、剪不宜用此法灭菌,以免变钝;
5.瓶装液体灭菌时,如有塑料瓶盖要适当旋松瓶盖,并用牛皮纸或纱布包扎瓶口;如有橡皮塞时,应插入针头排气,切记要保持瓶内外的连通,防止高温膨胀爆裂;
6.注明灭菌日期和物品保存时限,一般可保留1~2周;
7.应有专人负责,每次灭菌前,应检查安全阀的性能,以防压力过高发生爆炸,保证安全使用。